腫瘤壞死因子(tumornecrosisfactor，TNF)是一種具有多種生物活性的細(xì)胞因子。人TNF-α基因編碼前體蛋白，其信號肽將前體蛋白固定在細(xì)胞膜上，成為具有活性的跨膜干擾素(TNF)，分子質(zhì)量為26×10³，經(jīng)酶切去除信號肽生成分泌型TNF-α，分子質(zhì)量為17×10³。TNF-α細(xì)胞來源廣泛，包括各種**細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、表皮細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、星形細(xì)胞、成骨細(xì)胞等。

    TNF-α具有廣泛的生物學(xué)活性，如：參與炎性反應(yīng)和**應(yīng)答，抗腫瘤，參與內(nèi)**性休克等病理過程，引起惡病質(zhì)等。其具有雙重作用，,一方面在機體**調(diào)節(jié)，機體生理功能和抗感染等方面發(fā)揮重要作用，另一方面若持續(xù)釋放或產(chǎn)生過多則會引起發(fā)熱!、休克、惡病質(zhì)等，同時TNF-α可進(jìn)一步誘導(dǎo)IL-6、IL-8、IL-10等細(xì)胞因子的產(chǎn)生，這些促炎性細(xì)胞因子參與體內(nèi)急性反應(yīng)、發(fā)熱反應(yīng)、引起趨化肽釋放等，還可使內(nèi)皮細(xì)胞活化而導(dǎo)致血管通透性增加。

本實驗采用雙抗體夾心法。抗人TNF-α單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的TNF-α會與單抗結(jié)合，游離的成分被洗去。加入生物素化的抗人TNF-α抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合；抗人TNF-α抗體與結(jié)合在單抗上的人TNF-α結(jié)合而形成**復(fù)合物，游離的成分被洗去加入顯色劑，若反應(yīng)孔中有TNF-α，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑顯藍(lán)色，加終止液變黃。在450 nm處測OD值，TNF-α濃度與OD₄₅₀值之間呈正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中人TNF-α濃度。

本試劑盒用于體外定量檢測人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液或組織勻漿上清液中人TNF-α濃度，供科研使用。

試劑盒內(nèi)容物：

保存條件：

   4℃保存，6個月有效。

注意事項：

1.   短期內(nèi)使用可將試劑盒保存在2-8℃，如長時間請于-20℃保存。

2.   濃縮生物素化抗體（2a），濃縮酶結(jié)合物（3a）裝量極少，運輸中可能會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請用手甩幾下或離心處理，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。

3.   從冰箱中取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。

4.   不建議重復(fù)使用標(biāo)準(zhǔn)品。

5.   充分混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤其重要，*好使用微量振蕩器，也可在反應(yīng)過程中手工混勻。

6.   在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙復(fù)孔或三復(fù)孔。

7.   為了您的**和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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