試劑盒簡介:
IL-1是一種單核因子。1972年Gery等發現人白細胞培養的上清中含有一種可溶性物質,這種物質可促進小鼠胸腺細胞對植物血凝素(PHA)的有絲分裂反應。 起初命名為**細胞激活因子(lymphocyte-activating factor, LAF)或內源性熱原質(endogenous pyrogen)、 破骨細胞激活因子 (osteoclast activating factor)、 黑素瘤細胞生長抑制因子 (melanomagrowth inhibitory factor)等,1979年國際統一命名為IL-1。
1. IL-1的產生 IL-1可由多種細胞合成和分泌。
(1)單核細胞、巨噬細胞(如腹腔粘連細胞peritoneal cell,PC)、 樹突狀細胞等在攝取抗原抗體復合物后或在抗原提呈過程中可產生IL-1。在大多數刺激劑刺激外周血單個核細胞 (PBMC)條件下,IL-1β mRNA水平要高于IL-1α mRNA 20~25倍。
(2)小鼠巨噬細胞細胞系P388D1、J774、PU5-1.8、 WEHI-3以及人前單核細胞株U937等在脂多糖(LPS)刺激后都能分泌大量的IL-1。
(3)表皮細胞、NK細胞、B細胞、成纖維細胞、內皮細胞、腦膠質星狀細胞、腎小球系膜細胞(mesangial cell)、滑膜襯里細胞(synovial lining cell)、平滑肌細胞、上皮細胞、胎盤細胞、白血病細胞、PMN等在某些條件下亦可產生IL-1。
許多因素可以直接影響單核-巨噬細胞IL-1的分泌:①細胞因子如巨噬細胞激活因子(MAF)、集落刺激因子(CSF)、IFN-α、IFN-γ對IL-1產生具有增強作用。②LPS、PPD、BCG和李斯特菌, 葡萄球菌、鏈球菌外**, 活病毒等也是IL-1產生的刺激劑。 在外周血中20pg/ml內**刺激單核細胞即可產生IL-1,因此在一般培養條件下,由于微量內**的污染可刺激單核細胞分泌IL-1。10ng/ml LPS可使單核細胞合成IL-1增加100倍。③蛋白激酶C(PKC)的激活劑乙酸肉豆蔻佛波醇(phorbol myristate acetate, PMA)以及鈣離子載體(calcium ionophore)如A23187均具有強烈的刺激作用。④皮質類固醇和前列腺素則對IL-1的產生有抑制作用。
2. IL-1的分子結構和基因 完整的人IL-1α和IL-1β基因組分別為10.5kb和7.8kb。人和小鼠IL-1基因定位于2號染色體,均含7個外顯子。IL-1前體(ProIL-1)為31kDa,通過蛋白水解酶裂解形成成熟的IL-1分子。IL-1在不同種屬中有較高同源性。在氨基酸水平上,IL-1α和IL-1β在不同種屬同源性分別為60%~70%和75%~78%;但在同一種屬中IL-1α與IL-1β同源性只有25%。人IL-1α(PI5.0)和IL-1β(PI7.0)分別由159和153個氨基酸殘基組成,分子量約17.5kDa, 同源性為28%。IL-1對糜蛋白酶敏感。 不同細胞所產生IL-1的等電點可有所差異。
本試劑盒采用雙抗體夾心法。抗人IL-1β單抗包被于酶標板上,標本和標準品中的IL-1β會與單抗結合,加入生物素化的抗人IL-1β抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素,生物素與親和素特異性結合;抗人IL-1β抗體與結合在單抗上的人IL-1β結合而形成**復合物,若反應孔中有IL-1β,會有顯色反應。在450 nm處測OD值,IL-1β濃度與OD450值之間呈正比,可通過繪制標準曲線求出標本中IL-1β濃度。
本試劑盒用于體外定量檢測人血清、血漿、細胞培養上清液或組織勻漿上清液中IL-1β濃度,供科研使用。
試劑盒內容物:
產品名稱 |
規格 |
1a標準品 |
2支(凍干) |
1b標準品稀釋液 |
1瓶 |
2a濃縮生物素化抗體 |
1支 |
2b生物素化抗體稀釋液 |
1瓶 |
3a濃縮酶結合物 |
1支 |
3b酶結合物稀釋液 |
1瓶 |
4濃縮洗滌液20× |
1瓶 |
顯色液 |
1瓶 |
終止液 |
1瓶 |
抗體包被板條 |
8*12 |
封板膠紙 |
3張 |
說明書 |
1份 |
保存條件:
4℃保存,6個月有效。
注意事項:
1. 短期內使用可將試劑盒保存在2
2. 濃縮生物素化抗體(
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,加熱使結晶完全溶解后再使用。
4. 不建議重復使用標準品。
5. 充分混勻對反應結果尤其重要,*好使用微量振蕩器,也可在反應過程中手工混勻。
6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙復孔或三復孔。
7. 為了您的**和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。上海歐韋達儀器科技有限公司提供上等的分子生物學試劑和試劑盒、培養基和培養耗材、細胞因子和細胞分離液、抗體和elisa試劑盒及常用生物試劑等,大量現貨火爆促銷中,歡迎撥打021-61805606洽談選購!