人白介素8(h IL-8)elisa試劑盒
試劑盒簡介:
白介素-8(IL-8)是嗜中性粒細(xì)胞特異性的CXC家族的趨化因子成員之一,是一個潛能的嗜中性粒細(xì)胞趨化因子與激活因子。IL-1、TNF、LPS和PMA均能誘導(dǎo)單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和表皮細(xì)胞等合成和分泌IL-8。PHA等絲裂原活化的T細(xì)胞也可產(chǎn)生IL-8。人類多種腫瘤細(xì)胞均可高表達(dá)IL-8。其中甲狀腺癌、鱗狀細(xì)胞癌、 黑素瘤等可組成性產(chǎn)生IL-8,而星狀細(xì)胞瘤、肝癌、腎細(xì)胞癌等則需在IL-1β或TNF-α等刺激下才合成和分泌IL-8。
IL-8分子量8.3kDa,不成熟的IL-8為99個氨基酸,單核細(xì)胞產(chǎn)生的成熟IL-8分子主要形式為72個氨基酸,而內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的成熟IL-8分子主要為77個氨基酸。在α亞族中,IL-8與GROα、GROβ、GROγ、ENA-78和NAP-2相對有較高源性。 IL-8分子含4個Cys,無N糖基化位點,IP8.0~8.5,耐熱、耐堿,但對巰基化合物敏感。
IL-8的生物學(xué)活性:(1)趨化和激活中性粒細(xì)胞,IL-8可使中性粒細(xì)胞外形改變,促進(jìn)其脫顆粒,激活中性粒細(xì)胞并使其產(chǎn)生呼吸爆發(fā)(respiratory burst)、釋放超氧化物(O2-、H2O2)和溶酶體酶;(2)趨化嗜堿性粒細(xì)胞,并刺激其釋放組織胺,可能與速發(fā)型超敏反應(yīng)的發(fā)生有關(guān)。 此外,還可刺激GM-CSF或IL-5預(yù)先處理的嗜酸性粒細(xì)胞的脫顆粒作用;(3)趨化T**細(xì)胞,可趨化部分靜止的CD4+或CD8+T細(xì)胞;(4)IL-8是角化細(xì)胞的復(fù)合促有絲分裂原(co-mitogen), 也是黑素瘤細(xì)胞的自分泌生長因子。
本實驗采用雙抗體夾心法。抗人IL-8單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的IL-8會與單抗結(jié)合,游離的成分被洗去。加入生物素化的抗人IL-8抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素,生物素與親和素特異性結(jié)合;抗人IL-8抗體與結(jié)合在單抗上的人IL-8結(jié)合而形成**復(fù)合物,游離的成分被洗去加入顯色劑,若反應(yīng)孔中有IL-8,辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑現(xiàn)藍(lán)色,加終止液變黃。在450 nm處測OD值,IL-8濃度與OD450值之間呈正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IL-8濃度。
本試劑盒用于體外定量檢測人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液或組織勻漿上清液中人IL-8濃度,供科研使用。
試劑盒內(nèi)容物:
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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1a標(biāo)準(zhǔn)品
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2支(凍干)
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1b標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1瓶
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2a濃縮生物素化抗體
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1支
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2b生物素化抗體稀釋液
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1瓶
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3a濃縮酶結(jié)合物
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1支
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3b酶結(jié)合物稀釋液
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1瓶
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4濃縮洗滌液20×
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1瓶
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顯色液
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1瓶
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終止液
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1瓶
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抗體包被板條
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8*12
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封板膠紙
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3張
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說明書
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1份
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保存條件:
4℃保存,6個月有效。
注意事項:
1. 短期內(nèi)使用可將試劑盒保存在2-8℃,如長時間請于-20℃保存。
2. 濃縮生物素化抗體(2a),濃縮酶結(jié)合物(3a)裝量極少,運輸中可能會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請用手甩幾下或離心處理,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
4. 不建議重復(fù)使用標(biāo)準(zhǔn)品。
5. 充分混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤其重要,*好使用微量振蕩器,也可在反應(yīng)過程中手工混勻。
6. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙復(fù)孔或三復(fù)孔。
7. 為了您的**和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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