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產(chǎn)品名稱: Percoll細胞分離液(Pharmacia)
產(chǎn)品型號: 17-0891-01
產(chǎn)品展商: 其他品牌
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簡單介紹
Percoll細胞分離液(Pharmacia)產(chǎn)品名稱:Percoll細胞分離液(Pharmacia) 17-0891-01 英文名稱: Percoll 產(chǎn)品貨號: 17-0891-01 產(chǎn)品規(guī)格: 100ML 1L 試劑級別: 試劑級 產(chǎn)品產(chǎn)地: USA 產(chǎn)品商標(biāo): Pharmacia
Percoll細胞分離液(Pharmacia)
的詳細介紹
Percoll細胞分離液(Pharmacia) Percoll細胞分離液(Pharmacia) Percoll細胞分離液(Pharmacia)
Percoll不連續(xù)密度梯度沉淀法分離純化**細胞和**母細胞
(一)原理
Percoll是一種包有乙烯吡咯烷酮的硅膠顆粒。滲透壓很低(<20mosm/kg H2O), 粘度也很小,可形成高達1.3g/ml密度,采用預(yù)先形成的密度梯度時可在低離心力(200~1000g)于數(shù)分至數(shù)十分鐘內(nèi)達到滿意的細胞分離結(jié)果。由于Percoll擴散常數(shù)低,所形成的梯度十分穩(wěn)定。此外,Percoll不穿透生物膜,對細胞無毒害,因此廣泛用于分離細胞、亞細胞成分、**及病毒,還可將受損細胞及其碎片與完好的活細胞分離。
(二)操作方法及注意事項
1.不同濃度(密度)Percoll溶液的制備: 先用9份Percoll與1份8.5% NaCl或1.5MPBS混合達到生理性滲透壓,然后用生理溶液(0.85% NaCl或0.15M PBS)稀釋到所需濃度。
Percoll濃度(%) 70 60 50 40 30 20
比重g/ml 1.090 1.077 1.067 1.056 1.043 1.031
2.不連續(xù)密度梯度Percoll層的制備: 先將試管壁用牛血清濕潤,除去多余血清,這種預(yù)處理可使逐層疊加的Percoll液平穩(wěn)沿管壁流下,使形成滿意的界面。在制備過程中一般用長針頭注射器從高密度向低密度逐層放置,有時相鄰兩層Percoll比重相差不大時,可將Percoll液放入注射器中,小針頭斜面緊貼管壁,任其自然慢慢流下。
3.裝樣:樣品體積和細胞濃度根據(jù)不同細胞而異,一般加樣體積不宜過大,細胞濃度也不可過高,否則會影響細胞的分離和回收。
4.離心:一般采用離心力為400g,時間20~25min。由于多層Percoll之間密度差別不大,因此離心機加速、降速時要慢,要平穩(wěn)。
5.取樣:當(dāng)所要分離的細胞絕大部分在兩層的界面時,可逐層去除Percoll液后收集界面部位的細胞;有時大部分細胞位于Percoll層中,則需要逐層收集。收獲含有Percoll液的細胞經(jīng)2次洗滌后可供培養(yǎng)或檢測用。
Percoll 細胞分離液
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Pharmacia
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100ml
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