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Western Blot時對NC膜孔徑的選擇
根據被轉移的蛋白分子量大小,要選擇不同孔徑的硝酸纖維素膜。因為隨著膜孔徑的不斷減小,膜對低分子量蛋白的結合就越牢固。但是膜孔徑如果小于0.1mm,蛋白的轉移就很難進行了。因此,我們通常用0.45μm和0.2μm兩種規格的硝酸纖維素膜。大于20kD的蛋白就可以用0.45μm的膜,小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜了,如果用0.45μm的膜就會發生“Blowthrough”的現象。
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