英文說(shuō)明書：
酪蛋白磷酸肽（CPP）：

Casein Phosphopeptide

Wako Pure Chemical Industries,Ltd.

CAS NO.: N/A

Grade: for Biochemistry

Regulation / Hazardous:

Storage condition: Keep at RT.

Manufacturer: Wako Pure ChemicalIndustries, Ltd.

Appearance:	White - slightlybrown, powder

This is a peptide obtained by degrading milk protein, or casein. Itis a kind of natural chelate compound and is drawing attention as asubstance accelerating passive absorption of calcium in the lowerpart of the small intestine. Its application to prevention ofanemia and osteoporosis is also being exploited. 


中文說(shuō)明書：
酪蛋白磷酸肽（CaseinPhosphopeptides,CPP）是以牛奶酪蛋白為原料，經(jīng)過(guò)單一或復(fù)合蛋白酶的水解，再對(duì)水解產(chǎn)物分離純化，進(jìn)而噴霧干燥后得到的含有磷酸絲氨酸簇的天然生理活性肽。　　酪蛋白占牛乳總蛋白的80％，它是多種長(zhǎng)度不同的短肽混合物，含有αs1、αs2、β和к-酪蛋白四種主要成分，其比例為34：8：33：9，**結(jié)構(gòu)均已**測(cè)定。α和β酪蛋白含有高含量的磷酸絲氨酰殘基，其中αs酪蛋白氨基酸殘基數(shù)為199，含8個(gè)磷酸絲氨酰基，β-酪蛋白由209個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成，含5個(gè)磷酸絲氨酰基。　　CPP的核心部位由3個(gè)磷酸絲氨酸殘基組成一個(gè)-Ser（P）-殘基簇，后面緊接著2個(gè)-G1u-殘基組成的。CPP具有很強(qiáng)的促鈣以及其它礦物元素吸收的活性,這是由于CPP的核心部位可以與鈣以及鐵、鎂等二價(jià)和某些三價(jià)礦物離子結(jié)合，同時(shí)也可以阻止CPP的進(jìn)一步水解（Kasai，1992）。　　Hiroshi等(1974)用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，酪蛋白可在動(dòng)物腸道內(nèi)形成CPPs并確定其結(jié)構(gòu)為SerP-SerP-SerP-Glu-Ile-Pro-Asn。Nicholas等(1974)用胰蛋白酶水解酪蛋白，經(jīng)過(guò)精制、純化得到CPPs，其核心結(jié)構(gòu)為：-SerP-SerP-SerP-Glu-Glu-。　　CPPs結(jié)構(gòu)中的磷酸絲氨酰殘基(-Ser(P)-)成簇存在，在腸道pH弱堿性環(huán)境下帶負(fù)電荷，可阻止消化酶的進(jìn)一步作用，使CPPs不會(huì)被進(jìn)一步水解而在腸中穩(wěn)定存在。這些氨基酸的負(fù)電荷側(cè)鏈，尤其是磷酸基團(tuán)是礦物質(zhì)結(jié)合的位點(diǎn)。CPPs能與某些二價(jià)的礦物離子形成可溶性的有機(jī)磷酸鹽，可充當(dāng)不同礦物質(zhì)的載體，尤其是鈣。而CPPs的持鈣力大小與其結(jié)構(gòu)有關(guān)，CPPs中氮與磷的摩爾比值（N/P）小，CPPs的肽鏈就短，磷酸基的密度大，則CPPs純度越高，促進(jìn)鈣的吸收和利用的作用也就越強(qiáng)。　　CPP是一種具有生物活性的多磷酸基肽，由于它含有三個(gè)磷酸基，可以和金屬離子，特別是鈣離子結(jié)合形成可溶性復(fù)合物，這種復(fù)合物的形成一方面可以有效的避免鈣在小腸的中性或微堿性環(huán)境中形成沉淀，另一方面它可以在沒(méi)有維生素D參與地條件下被腸壁細(xì)胞吸收，目前也是*有效的促鈣吸收因子。實(shí)驗(yàn)表明，一個(gè)分子的CPP能促進(jìn)1.43個(gè)鈣的吸收。CPP不僅可以作為鈣的載體，也可以作為鐵、錳、鋅、硒的載體。因?yàn)镃PP是從天然蛋白質(zhì)中提取的多肽，具有**反應(yīng)小、**可靠的優(yōu)點(diǎn)。所以已被公認(rèn)為應(yīng)用面較廣泛的功能性食品添加劑，它能促進(jìn)嬰幼兒與青少年的健康成長(zhǎng)和提高對(duì)中老年人的保健作用。　　二、CPPs結(jié)構(gòu) 　　CPPs分布于aSI、β-酪蛋白等牛乳酪蛋白的不同區(qū)域，其活性中心是連續(xù)的磷酸絲氨酰和谷氨酰簇，基本結(jié)構(gòu)可表示為：-SerP—SerP—SerP—Glu—Glu—。經(jīng)酶消化所產(chǎn)生的CPPs功能區(qū)結(jié)構(gòu)主要有：αSI(43-58)2P、αSI（59-79）5P、αS2(46-70)4P、β(1-28)4P、β(33-48)IP。由此可見(jiàn)，CPPs實(shí)際上是一類含有磷酸絲氨酰和谷氨酰簇的短肽，其產(chǎn)品的分子量是不均一的：動(dòng)物體內(nèi)分離的cpp比體外水解產(chǎn)物短，但含有相同的基本核心結(jié)構(gòu)。　　本產(chǎn)品是牛奶酪蛋白中CPP的活性中心是成串的磷酸絲氨酸和谷氨酸族，其基本結(jié)構(gòu)可表示為-serp-serp-serp-glu-glu-.　　牛αs1‐酪蛋白：Gly45-Serp-Thr-Glu-Asp51-Glu63-Serp-Ile-Serp-Serp-Serp- 　　-Glu-Glu70-Asn74-Serp-Val-Glu-Gln78- 　　牛 αs2-酪蛋白：-Val17-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu-Ser-Ile-Serp-Gln27- 　　-Gly55-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu-Serp-Ala-Glu63- 　　-Glu142-Serp-Thr-Glul45- 　　牛β-酪蛋白：-Glu14-Serp-Lcu-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu21- 　　-Glu34-Serp-Serp-Glu-Glu37- 　　人β酪蛋白：-Glu2-Thrp-Ile-Llu-Serp-Lcu-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu12- 　　大鼠 α-酪蛋白：-Asp18-Serp-Serp-Serp-Glu-Asp23- 　　三、酪蛋白磷酸肽（CPP）的制備 　　1、方法一：牛奶→酪蛋白→酶水解→精制→脫苦味→干燥→CPP成品 　　2、方法2 　　目前工業(yè)制備CPP的方法主要有鈣—乙醇沉淀法、膜分離法和離子交換法3種（湯亞杰，1998），而生產(chǎn)過(guò)程可分為酪蛋白的水解和CPP的分離兩步。　　鈣—乙醇沉淀法工藝路線：酪蛋白→胰蛋白酶水解（Ph-stat法檢測(cè)水解度）→酪蛋白水解液→鈣—乙醇沉淀→分離→干燥→CPP產(chǎn)品。　　膜分離法生產(chǎn)CPP的工藝路線：酪蛋白→酪蛋白水解液→過(guò)濾→分離→噴霧干燥→CPP產(chǎn)品。 　　根據(jù)對(duì)酪蛋白水解后的產(chǎn)物所采取的不同處理方法，將分離分為4種，即不經(jīng)過(guò)分離處理、鈣—乙醇沉淀后過(guò)濾、膜過(guò)濾和離子交換樹(shù)脂純化。然后進(jìn)行噴霧干燥得到CPP產(chǎn)品。　　焦宇知等（2004）采用Alcalase水解酪蛋白并運(yùn)用納濾技術(shù)生產(chǎn)CPP，與鈣—乙醇沉淀工藝進(jìn)行比較的結(jié)果顯示：在*佳反應(yīng)條件下，Alcalase對(duì)酪蛋白水解能力比胰蛋白酶強(qiáng)4%～8%，而且Alcalase比胰蛋白酶便宜；TNBS法替代Ph-stat法監(jiān)測(cè)酪蛋白水解，提高了準(zhǔn)確度，也可明顯降低CPP產(chǎn)品中的灰分含量。此方法生產(chǎn)的CPP在體外的功能試驗(yàn)表明，CPP可阻止亞鐵離子的沉淀，鈣結(jié)合能力隨著樣品中氮與磷的摩爾比的降低而增大，磷酸基的密度是CPP樣品結(jié)合鈣能力的關(guān)鍵指標(biāo)之一。　　王雋等（2004）研究結(jié)果表明復(fù)合酶比單酶水解度大，可以提高底物的利用率，水解速率增大。并且認(rèn)為生產(chǎn)中采用單一酶水解時(shí)水解度低，酶消耗量大，底物浪費(fèi)，CPP成本高。所以篩選合適的復(fù)合酶系、確定合適的酶促反應(yīng)條件，以及分離方法的改進(jìn)或結(jié)合是今后CPP生產(chǎn)的發(fā)展方向。　　3、方法三 　　以酪蛋白為原料，用蛋白酶水解，使酪蛋白磷酸肽游離，噴霧干燥成低純度產(chǎn)品，用離子交換樹(shù)脂脫除或用酶分解去除酪蛋白水解后呈現(xiàn)的苦味，再對(duì)酪蛋白水解物絡(luò)合分離，凝膠過(guò)濾或膜分離等方法進(jìn)行純化則可得高純度CPPs。該法仍存在4個(gè)方面問(wèn)題有待進(jìn)一步完善。　　(1)篩選合適的酶，目前一般采用特異性的蛋白酶。研究表明，如果僅用單一酶，則存在水解度低，消耗大量的酶和底物而導(dǎo)致成本高的問(wèn)題，所以有待研究出合適的復(fù)合酶體系以利CPPs制備的工業(yè)化。