用途:用于O157菌的顯色培養,O157菌顯亮紅色、淡紅色或紅色
大腸桿菌O157顯色培養基是青島海博生物公司改良的培養基,用于食品、病人糞便樣品中O157 菌的快速檢測。O157菌顯紫色,大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍色;其它**顯黃色或無色。本培養基的特異性高,可以克服SMAC培養基引起的假陽性和假陰性結果,是一種很理想的快速檢測培養基。
成份 (g/L)
特殊營養物質
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50.0
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混合顯色劑
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2.5
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瓊脂
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15.0
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pH 7.0 ± 0.1 25 ℃
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CT 添加劑 1ml/ 支 *5
此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得*佳的結果。
注意
此培養基僅供實驗室使用。
用法
稱取本品 13.5g 加入 200ml 蒸餾水,加熱煮沸溶解并不停攪拌,加熱 10-20 分鐘。冷卻至45-50 ℃時,加入 CT 添加劑混勻,
傾入無菌平皿。
注意:制備好的培養基一定要保持表面干燥,可在 37 ℃的培養箱中倒置放置 1-2 小時。
貯存
制備好的平板可保存 2-5 天,應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
操作步驟
1、按國家標準、 SN 標準、 FDA 標準或其它方法制備樣品液;
2、取 25 克樣品液加入 225ml mEC 肉湯或 mTSB 肉湯中, 37 ℃ 增菌培養18-24 小時;
3 、用 3mm 接種環取 1 環增菌液,劃線接種到 O157 菌顯色培養基上,做 2 個平板;
4 、 37 ℃培養 18-24h , O157:H7 菌顯紫色 , 大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍色,其它**顯黃色或無色;
5 、對典型菌落可做 O157:H7 菌血清學試驗和全套生化試驗。
質量控制
1 、外觀
此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡藍色。制備好的平板呈藍**固體培養基。
2 、微生物試驗
在 36 ± 1 ℃培養 18-24h 小時:
質控菌株
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ATCC
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生長情況
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菌落顏色
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大腸桿菌 O157
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+++
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紫色
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金黃色葡萄球菌
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25923
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-/+
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黃色
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大腸桿菌
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25922
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+++
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暗藍色
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沙門氏菌
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+++
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藍色
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奇異變形桿菌
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+++
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無色
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方法的局限性
本培養基對典型大腸桿 O157:H7 必須做血清學試驗或生化試驗。
典型特征
典型 O157:H7 菌顯紫色 , 大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍色。
參考文獻
1 、 Rappaport, F., and E. Henig. 1952. Media forthe isolation and differentiation of pathogenic Escherichia coli(serotypes 0111 and 055). J. Clin. Pathol. 5:361-362.
2. U.S. Food and Drug Administration. 1995.Bacteriological analytical manual, 8 th ed., AOAC International,Gaithersburg , MD.
3. Vanderzant, C., and D. F. Splittstoesser (eds.).1992. Compendium of methods for the microbiological examination offood, 3 rded. American Public Health Association, Washington , D.C.