1. 抗**藥敏紙片分類和名稱
類 別
中文名稱
英文名稱
縮 寫
劑 量
多烯類
兩性霉素 B
Amphotericin B
AMB
10 ug
制霉菌素
Nystatinum
NYS
50 ug
吡 咯 類
咪唑類
咪康唑/達克寧
Miconazole
MIC
益康唑
Enconazole
ECO
酮康唑
Ketoconazole
KET
15 ug
克霉唑
Clotrimazole
CLO
三唑類
氟康唑
Fluconazole
FLU
伊曲康唑
Itraconazole
ITC
8 ug
其 他
5-氟胞嘧啶
5-Flurocytosine
FC
1 ug
抗**藥敏專用NCCLS推薦的RPMI-1640平板
9 cm
注:紙片直徑9.2 mm,30片/支,2-8℃保存,效期見包裝。
2. 接種液的配制和接種
接種液的配制中,菌液濃度的控制是重要的,過濃會導致吡咯類抑菌圈判定困難出現假陰性。
對于大多數菌株,菌液濃度調成0.5麥氏濁度即可;克柔***應再稀釋5倍;隱球菌屬調成1.0麥氏濁度。
用無菌棉拭子沾取菌懸液,略擠壓,直接均勻涂布平板,*后沿平皿周邊繞兩圈,保證涂布均勻。然后,平皿放35℃開蓋倒扣干燥15分鐘,須待平板上的水分被瓊脂完全吸收后再貼紙片。紙片貼上后用鑷尖壓一下,使其貼平。建議9cm平皿一般貼直徑9.2cm的藥敏紙片4-5個。
3. 培養
在多數情況下,30-35℃培養18-24小時后馬上測量抑菌圈,時間過長會使抑菌圈變小而導致假耐藥。如果生長不好,抑菌圈不清(如:新型隱球菌)可適當延長培養時間至抑菌圈清晰為止。
4. 判讀標準
敏 感 ( S )
中 介 ( I )
耐 藥 ( R )
兩性霉素B (10 ug)
≥15 mm
10-14 mm
< 10 mm
制霉菌素 (50 ug)
咪康唑/達克寧 (10 ug)
≥20 mm
12-19 mm
≤11 mm
益康唑 (10 ug)
酮康唑 (15 ug)
克霉唑 (10 ug)
氟康唑 (15 ug)
伊曲康唑 (8 ug)
5-氟胞嘧啶 (1 ug)
注:
l 對于多烯類抗**藥(AMB和NYS),測量生長清晰的抑菌圈,抑菌圈內出現的菌落必須視為耐藥突變株。
l 對于吡咯類抗**藥(FLU、ITC、MIC、ECO、KET、CLO),在抑菌圈內可能會出現較小的部分被抑制的菌落。測量時以正常生長的菌落形成的抑菌圈為準,其內部的較小菌落不應視為突變株。
l 對于5-氟胞嘧啶(FC),測量生長清晰的抑菌圈,抑菌圈內出現的菌落通常為耐藥突變株。
l 抗**藥敏平板必須使用NCCLS推薦的RPMI-1640平板。使用其它平板可能會使FC無抑菌圈或抑菌圈減小。其它抗**藥敏的抑菌圈也有不同程度的改變。