抗**藥敏紙片的使用說明
1. 抗**藥敏紙片分類和名稱
類 別 | 中文名稱 | 英文名稱 | 縮 寫 | 劑 量 |
多烯類 | 兩性霉素B | AmphotericinB | AMB | 10 ug |
制霉菌素 | Nystatinum | NYS | 50 ug |
吡 咯 類 | 咪唑類 | 咪康唑/達克寧 | Miconazole | MIC | 10 ug |
益康唑 | Enconazole | ECO | 10 ug |
酮康唑 | Ketoconazole | KET | 15 ug |
克霉唑 | Clotrimazole | CLO | 10 ug |
三唑類 | 氟康唑 | Fluconazole | FLU | 15 ug |
伊曲康唑 | Itraconazole | ITC | 8 ug |
其 他 | 5-氟胞嘧啶 | 5-Flurocytosine | FC | 1 ug |
抗**藥敏專用NCCLS推薦的RPMI-1640平板 | 9cm |
注:紙片直徑9.2 mm,30片/支,2-8℃保存,效期見包裝。
2. 接種液的配制和接種
接種液的配制中,菌液濃度的控制是重要的,過濃會導致吡咯類抑菌圈判定困難出現假陰性。
對于大多數菌株,菌液濃度調成0.5麥氏濁度即可;克柔***應再稀釋5倍;隱球菌屬調成1.0麥氏濁度。
用無菌棉拭子沾取菌懸液,略擠壓,直接均勻涂布平板,*后沿平皿周邊繞兩圈,保證涂布均勻。然后,平皿放35℃開蓋倒扣干燥15分鐘,須待平板上的水分被瓊脂完全吸收后再貼紙片。紙片貼上后用鑷尖壓一下,使其貼平。建議9cm平皿一般貼直徑9.2cm的藥敏紙片4-5個。
3. 培養
在多數情況下,30-35℃培養18-24小時后馬上測量抑菌圈,時間過長會使抑菌圈變小而導致假耐藥。如果生長不好,抑菌圈不清(如:新型隱球菌)可適當延長培養時間至抑菌圈清晰為止。
4. 判讀標準
中文名稱 | 敏 感( S) | 中 介( I) | 耐 藥( R) |
兩性霉素B (10ug) | ≥15mm | 10-14mm | < 10mm |
制霉菌素 (50ug) | ≥15mm | 10-14mm | < 10mm |
咪康唑/達克寧(10ug) | ≥20mm | 12-19mm | ≤11mm |
益康唑(10ug) | ≥20mm | 12-19mm | ≤11mm |
酮康唑(15ug) | ≥20mm | 12-19mm | ≤11mm |
克霉唑(10ug) | ≥20mm | 12-19mm | ≤11mm |
氟康唑(15ug) | ≥20mm | 12-19mm | ≤11mm |
伊曲康唑(8ug) | ≥15mm | 10-14mm | < 10mm |
5-氟胞嘧啶(1ug) | ≥20mm | 12-19mm | ≤11mm |
注:
l 對于多烯類抗**藥(AMB和NYS),測量生長清晰的抑菌圈,抑菌圈內出現的菌落必須視為耐藥突變株。
l 對于吡咯類抗**藥(FLU、ITC、MIC、ECO、KET、CLO),在抑菌圈內可能會出現較小的部分被抑制的菌落。測量時以正常生長的菌落形成的抑菌圈為準,其內部的較小菌落不應視為突變株。
l 對于5-氟胞嘧啶(FC),測量生長清晰的抑菌圈,抑菌圈內出現的菌落通常為耐藥突變株。
l 抗**藥敏平板必須使用NCCLS推薦的RPMI-1640平板。使用其它平板可能會使FC無抑菌圈或抑菌圈減小。其它抗**藥敏的抑菌圈也有不同程度的改變。